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细胞凋亡的基因调控是怎样完成的?细胞凋亡有何生物学意义
细胞凋亡的基因调控:
细胞凋亡指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。生物体内细胞在特定的内源和外源信号诱导下(其死亡途径被激活(并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。是程序性死亡过程的一种主要形式(强调的是形态学上的改变。它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞联系中断、内质网与细胞膜融合(最终细胞片段化形成许多细胞凋亡体)被其他细胞吞入。
细胞凋亡的意义:
细胞凋亡和细胞增殖都是生命的基本现象,是维持体内细胞数量动态平衡的基本措施。在胚胎发育阶段通过细胞凋亡清除多余的和已完成使命的细胞,保证了胚胎的正常发育;在成年阶段通过细胞凋亡清除衰老和病变的细胞,保证了机体的健康。和细胞增殖一样细胞凋亡也是受基因调控的精确过程。
细胞凋亡有哪些基因在调控:
ced基因:线虫的eed.3和ced一4为促凋亡基因,哺乳类动物和eed.3相似基因为ICE,是一种半胱氨酸蛋白酶;ted一9是抑制凋亡基因Il9】,人的bcl-2和物促凋亡基因。ICE作用于IL.1p前体。抑制ICE的基因有牛痘病毒的Crm A和杆状病毒的P53,对细胞凋亡都有较强的抑制作用;
hd.2家族:hc1.2家族有Bcl—x、Bax、Bak和Bad等成员,bc1.2可以通过CED一4作用调节caspases和线粒体通透性转变,从而防止凋亡产生,与肿瘤细胞增殖和癌变有关[201,而Bax有促进凋亡的作用;
c.myc家族:c.myc具有促进细胞增殖和促使细胞凋亡双向的调节作用,这主要决定于其上游的信号来源;~TNV受体家族:Fas是TNF受体家族中研究最详细的成员,Fas为死亡受体。Fas—L是T淋巴细胞产物,Fas和Fas.L结合诱导细胞凋亡;~p53基因:野生型诱导细胞凋亡,通过细胞凋亡抑制肿瘤的生长 。它作用在细胞周期和细胞受损伤时,促使细胞凋亡;
Rh和E2F:Rb有促凋亡作用,E2F包括E2F一1、E2F一2、E2F一3、E2F一4和E2F一5,共5种紧密相关的转录因子,其中E2F一1、E2F,2和E2F,3结合Rb蛋白,而E2F一4和E2F-5主要结合Rb的相关蛋白p107和p130。E2F一1具有双重作用,当E2F一1与Rh蛋白结合时,细胞周期进程被抑制。但当Rh蛋白缺失时E2F一1刺激细胞增殖。可能细胞内E2F的浓度或者其它细胞周期调节因子存在与否,影响E2F.1决定发挥细胞生长还是细胞凋亡作用[Z21;
ras:ras是癌基因,它的作用是抑制细胞凋亡。

成精子囊素发现的过程
蕨类植物位于维管植物进化树的中间位置,具有明显世代交替。无性生殖产生孢子, 有性生殖器官是精子器和颈卵器, 精子器产生精子, 颈卵器产生卵。大多数蕨类植物的孢子大小形状都相同, 称为孢子同型, 少数有大、小孢子囊之分, 产生大、小孢子, 称为孢子异型。同型孢子蕨有许多特点适合于配子体性别决定、分化和发育的研究: 孢子体和配子体独立生活(种子植物配子体被孢子体组织包围, 分离和研究都困难) , 便于分别对两者进行研究; 配子体(原叶体) 结构简单, 多为背腹分化的绿色叶状体, 幼小的原叶体通常仅由一层细胞构成, 能直接在显微镜下研究其细胞的大小、形状、分裂速度、生长速度和分裂面的变化,配子体的发育受成精子囊素调控, 发育阶段明显, 易于培养, 生长周期短, 有雌雄同体或雌雄异体的植物,分离容易; 通过完全自体受精能产生基因位点完全纯合的孢子体, 突变体筛选容易,孢子体发达, 有根、茎、叶分化和较原始的维管组织构成的输导系统, 能产生大量孢子, 孢子采集方便, 易于贮藏,配子体发育、性器官分化和有性生殖(包括性别决定) 研究, 已积累了一定的背景资料。上述特点为利用分子生物学手段研究维管植物配子体发育提供了很大方便, 其中的水蕨属( Ceratopteris ) 植物被认为是研究植物性别决定的模式植物1 水蕨概述水蕨为半水生的亚热带蕨类植物。其生活周期较短,约为3~4 个月。孢子体每月形成的孢子叶能产生大约106 个孢子,孢子萌发两周后配子体就能达到性成熟,此时配子体大小为1~2 mm。孢子叶叶轴上能产生数百个有光合能力、可用于营养繁殖的芽。水蕨受精有三种方式: 完全自体受精( in2t ragametophytic selfing 或automixis ,同一配子体的精子和卵子自体受精形成基因位点完全纯合的孢子体的生殖方式,种子植物无此类有性生殖方式) ;自体受精(intergametophytic selfing 或autogamy ,同一孢子体的不同孢子形成的配子体之间的精子和卵子受精形成孢子体的生殖方式) ;异株受精(intergame2tophytic crossing 或xenogamy ,不同孢子体的孢子形成的配子体之间的精子和卵子受精形成孢子体的生殖方式)。经辐射、EMS 等处理孢子可得到配子体突变体。孢子萌发形成单倍体( n) 配子体, 突变体易筛选。为确定突变基因的显隐性, 可通过无孢子生殖分别产生突变体和野生型的双倍体配子体(2n) , 然后受精产生孢子体(4n) , 该孢子体的配子体(2n) 表型会分离, 如果野生型: 突变体= 6∶1 说明突变基因是显性; 如果野生型: 突变体= 1∶6 说明突变基因是隐性。水蕨属有一些双倍体和四倍体纯合体被作为实验材料, 最常用的是双倍体株系ΦN8 、176D 和Hn2n。它们孢子叶的形态差异较大。ΦN8 采自尼加拉瓜, 每个孢子囊有32 个孢子; Hn2n 和176D 分别采自古巴和圭亚那, 两者的每个孢子囊都为16 个孢子。和ΦN8 、Hn2n 相比176D 对Ace 敏感性低, 培养时形成的雄配子体少。2 水蕨性别决定有关的因素211 水蕨性别决定的激素调控成精子囊素对蕨类性别表达的影响于1950 年被DÊpp 发现。大多数同型孢子蕨能分泌成精子囊素,并对其发生反应。孢子萌发后,生长快的配子体形成雌配子体或雌雄同体配子体并分泌成精子囊素,而生长慢的则在成精子囊素的影响下成为雄配子体Schedlbauer 和Klekowski 于1972 年得到C.richardii 成精子囊素(Ace) 并研究了它对配子体发育的影响。C. richardii 对Ace 的反应只有一个极短的时间,从孢子壁破裂到四个细胞的配子体。在此期间,如果环境中一直有Ace 存在,则形成雄配子体;如果除去环境中的Ace ,雄配子体上还未发生性决定和性分化的细胞就会逆转,雄配子体就转化为雌雄同体配子体。即对雄配子体而言,无论性诱导阶段还是性维持阶段,都需要Ace 存在,相反,雌雄同体配子体发育是稳定的,一旦决定,就不会逆转,与Ace 存在与否无关。赤霉素( GA) 能诱导密穗蕨( A nemia phylli2tidis) 、A . rot undif olia 和海金沙( L ygodium japon2icum) 形成精子器,与天然成精子囊素(Aan) 诱导密穗蕨原叶体产生精子器的效应极为相似,但GA 无法诱导水蕨形成精子器。GA 生物合成的抑制剂矮壮素(CCC) 、嘧啶醇(ancymidol) 和AMO21618 抑制Ace 诱导水蕨形成精子器的能力。脱落酸(ABA) 阻止水蕨属植物对Ace 的反应。成精子囊素对蕨类的生存竞争具有积极意义:同一生境中发育较快的配子体形成雌配子体或雌雄同体配子体, 其侧生分生组织分泌成精子囊素〔7〕,诱导其它孢子萌发形成雄配子体, 增加了环境中精子的浓度, 有利于自身得到优秀的精子; 通过抑制其它孢子形成雌雄同体配子体, 利于自身充分利用有限资源产生合子和孢子体; 增强较小配子体在竞争环境中生殖行为成功的几率(形成雄配子体) ;促进配子体之间的杂交, 保证遗传的多样性。从单个植株的角度来看, 这似乎是蕨类植物之间的竞争, 对蕨类植物其它个体的生存不利, 但是, 从蕨类植物整体的角度来看, 这种竞争有利于蕨类植物的生存。212 水蕨性别决定的其它调控因素Schedlbauer 发现水蕨( C. thalict roides) 孢子的大小和孢子存储的营养物质的量、孢子萌发时间、配子体发育速度都相关。快速生长的配子体成为雌雄同体配子体,而发育较慢的配子体在其影响下成为雄配子体。培养密度、生长速度和营养状态等因素与性别决定也有关。一般而言,较弱的光照、较高的培养密度、处于饥饿状态等有利于精子器的形成,可能是营养生长的衰减导致了精子器发生基因的表达。此现象在植物界比较普遍,利于物种的生存,是物种长期适应环境的结果。213 水蕨性别决定的遗传学和分子生物学研究蕨类植物性器官分化的分子生物学研究开展较晚,标志性工作是对Ace 不敏感C. richardii 雌雄同体突变体her 、t ra 和f em 的分离和研究。已分离的影响性别决定突变体有her( hermaphroditic ) 、t ra ( t ransf ormer ) 、f em ( f emi2niz ation) 、man ( many antheridia ) 、dim ( disorga2nized meristem ) 、HαTUB E1 b ( i rregular meris2tem)和abr ( abscisic acid2resistant ) 。her 对Ace不敏感,即使有Ace 也不形成雄配子体,总是形成雌雄同体配子体; t ra 对Ace 不敏感,即使没有Ace 也不形成分生组织和颈卵器,总是形成雄配子体; f em对Ace 不敏感,无论Ace 存在与否都不形成精子器,而是形成分生组织和大量的颈卵器; man 无论Ace存在与否都形成大量的精子器; HαTUB E1 b 配子体多形成较大的边缘分生组织或多个边缘分生组织,有时也形成中央分生组织; abr 对ABA 不敏感,环境中同时有ACE和ABA 时发育为雄配子体,只有ABA 时发育为正常的雌雄同体配子体。FEM 和TRA 是主要性别决定基因, FEM 促进雄配子体形成, TRA 促进雌配子体形成。FEM 和TRA 的表达相互抑制, 同一配子体中只表达其中之一, 是表达FEM 还是TRA 和成精子囊素的存在与否相关。成精子囊素激活HER 基因, HER 基因的活化抑制TRA 基因,FEM 基因得以表达, 产生雄配子体。成精子囊素缺乏, FEM 基因表达被抑制, TRA 基因得以表达,产生雌配子体。以上分析基于经典遗传学,其分子基础还有待研究。配子体根据环境因素决定性别的性别决定机制在多种动物中也存在,大多数植物的性别是由遗传决定的。 目前,已经从C. richardii 的雄配子体中克隆到了Ace 诱导基因,其cDNA(Hn153) 在Ace 处理后5~8 d 的配子体中有相对高的表达;在小于4 d 的配子体、孢子体组织和成熟雌雄配子体中都没有表达。 ΦN8 、176D 和Hn2n 的多态性( PFL Ps) 研究发现,176D 和Hn2n 的多态性图谱较为相似,ΦN8 与176D 和Hn2n、以及四倍体株系的多态性图谱差异较大。利用102mer 的随机引物对它们的基因组DNA 进行PCR 放大(RAPDs) 得到了相同的结果,该结果为进一步制定水蕨基因组图谱提供了条件。214 水蕨MADS2box 基因研究MADS2box 基因是广泛存在的调节基因家族,分为A RG802like (或S R F) 、M EF22like 和MIKC 类基因3 类。前两者主要出现在动物和真菌,MIKC类基因只见于植物。MIKC 类基因在花分生组织、花器官及各种营养器官中时空表达模式不同,和植物所处的内外环境密切相关,起着不同的功能,是了解最多的植物调节基因家族,它们在花器官发育中扮演的角色尤其引人注目,是目前植物发育生物学研究的热点。蕨类植物是已发表MADS2box 基因序列的最原始植物类群。包含MADS2box 基因序列的水蕨cDNA 属MIKC 类基因,和种子植物MADS2box基因序列同源性极高,说明蕨类植物和种子植物曾有一共同祖先。水蕨MADS2box 基因形成3 个独立的进化枝,交错排列于种子植物基因之间进化枝之间,所以蕨类植物与种子植物的共同祖先至少有两种MIKC 类基因,该类基因发生于比蕨类植物更原始的植物类群。克隆水蕨MADS2box 基因的部分探针或引物序列来源于拟南芥和金鱼草花同源异型基因,但没有得到它们的直向同源基因,也许和蕨类植物缺少胚珠、心皮、雄蕊和花被片等结构有关。但是也有相反文献:即从C. richardii 克隆了被子植物分生组织特有的同源异型基因和花特有的同源异型基因的同源基因。水蕨MADS2box 基因在孢子体、配子体时期都表达,在植物发育和细胞分化中有更广泛的功能,但是被子植物花器官决定同源异型基因表达有严格的时空限制。部分水蕨MADS2box 基因有非典型植物MADS2box 基因特征, CRM1 , CRM4( CerMADS 1) , CRM6 ( CerMADS 2) 和CRM9 都是由一较大的初始转录物经可变剪接而来,这是动物和植物转座子元件M EF22like 基因的典型特征,在已报道的150 多个MIKC 类基因中是特例,可变剪接是一个基因产生不同蛋白质的古老机制。多数水蕨cDNA 能编码(N) MIKC 类蛋白质,但CRM11 ,CRM15 和CMADS 5 无ORF , 有无功能还不清楚。3 和种子植物相比,蕨类植物是原始的,经济价值也不高,但是,正是由于蕨类植物的原始性及其简单而独特的配子体结构引起了植物学家们的青睐。经过上百年的研究,我们对蕨类植物的形态学、分类学、细胞学和遗传学等都有了较为深刻的认识,为利用分子生物学方法进一步研究植物提供了条件。而水蕨属植物由于其生长发育的特点使其成为研究植物性别决定和配子体形态建成的模式植物,倍受关注。目前关于水蕨发育的分子生物学研究已经开始,我们相信利用该材料的科学研究必将取得更多成果。
企业不使用lims的后果,对企业造成什么样的影响?
企业实验室常遇到的几个问题:
1、信息不互通,资源不共享
传统的实验室,没有完善的资源管理办法,很多资料只是无序的堆积,对于实验室工作的开展造成很大的困扰。
2、难以溯源数据
传统的实验室没有完善的溯源系统,常常会在发现数据失误后找不到失误的原因,从而导致浪费人力、物力资源,拖慢工作进程。
3、出报告数量大,编制报告效率低
报告格式多样化Word或其他相关软件制表,需要手工调整报告格式,不同的报告模板每次都要调整,调整好的报告流转到下一个人的手中,很可能因为各种原因改变了报告的格式,使得报告又要重新重新调整,加大了人员重复劳动的工作量,降低了工作效率。实验数据要求力求精确、真实,减少误差,然后人工数据录入等环节难免会出现误差。
4、自动化水平低
常规数据(如样品编号等)不能自动生成,检验结果需要人工判定,很多重复、相同的数据信息(如结论用语)需人工录入。
5、仪器设备的管理复杂混乱
仪器设备的领用、借用、维修、检定,全凭仪器管理人员用纸质档案记录,对于即将到期检定的仪器,需要管理人员按上次检定时间和检定周期人工计算出来,还常常会出现遗漏或超期送检、仪器去向无法知晓的情况;
6、缺乏智能流程管理,没有真正实现多人分
人工管理或使用其他相关软件管理,不能对样品的流转、处理进行记录和管理,不能对样品的整个流程:接收、入库、检验、处理有整体的记录和控制;也不能对报告从登记到报告发放所经过的流程进行有效管理、流转、查看,很难跟踪检验报告工作进行到哪个环节。
那么企业实施青之实验室系统LIMS在哪些方面提升效能呢?
1.减少代价高昂的数据录入错误,人工录入数据具有内在风险。为缓减该项风险,企业可以制定繁琐的审核流程,但这样做会给流程增加不必要的成本和时间。现代实验室使用LIMs实现实验室流程自动化,消除人为错误。通过扫描条形码或上传批量文件,以电子化方式识别样品,将减少人工识别样品相关的数据输入错误。条形码技术还可向每个样品、容器和试剂分配独特的识别码,从而避兔混淆,消除样品经过工作流各步骤时产生的转录错误。
2.系统快速检索能力助力信息快速获取
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3.与第三方应用软件部署灵活融合
实验室很可能会使用外来的软件解决方案。简化系统间的信息流可实现流程自动化,直接对底线业绩产生影响。例如, CRO想要通过客户关系管理( CRM)系统管理客户;制造企业依赖企业资源规划(ERP )解决方案管理业务。现代LIMS可通过应用编程界面( API )对接上述解决方案。这种双向界面使得实验室能够自动通知会计部门,以便向客户发出账单或发运产品。
4.精细化管理试剂和耗材
试剂和耗材进入实验室后,相关信息输入LIMS。这样, LIMS将跟踪它们的失效日期,跟踪包含上述试剂的配方,并告诉您什么时候需要补货。由于LIMS了解您的库存情况,它还能减少订货过多,从而避免浪费和成本上升,并消除意外的试剂耗竭,防止工作延误或项目受阻。LIMS还可跟踪何时及如何使用试剂,便于您了解哪些样品使用了相关试剂。
5.优化仪器预约使用
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实验室信息化管理系统LIMs系统帮助实验室主管提高团队和实验室效率,快速发现和纠正问题,确保遵守标准操作程序。在LIMS驱动下,实验室不仅能更好地开展科研活动,并能实现更好的经济效益与商业成果。
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